Медицински експерт на статията
Нови публикации
Полимеразна верижна реакция (PCR) при диагностицирането на инфекциозни заболявания
Последно прегледани: 23.04.2024
Цялото съдържание на iLive е медицински прегледано или е проверено, за да се гарантира възможно най-голяма точност.
Имаме строги насоки за снабдяване и само свързваме реномирани медийни сайтове, академични изследователски институции и, когато е възможно, медицински проучвания, които се разглеждат от специалисти. Имайте предвид, че номерата в скоби ([1], [2] и т.н.) са линкове към тези проучвания.
Ако смятате, че някое от съдържанието ни е неточно, остаряло или под съмнение, моля, изберете го и натиснете Ctrl + Enter.
PCR - един от методите за ДНК диагностика, позволяващи да се увеличи броят на копията на откриваема част на генома (ДНК) на бактерии или вируси е един милион пъти, използвайки ДНК полимераза ензим. Сегментът на нуклеиновата киселина, тестван за даден геном, се умножава (усилва) многократно, което позволява да бъде идентифициран. Първо, ДНК молекула на бактерии или вируси чрез нагряване разделена на две вериги, след това в присъствието на синтезираните ДНК праймери (последователност от нуклеотиди, специфични за определени геномния) ги свързване с допълнителни участъци на ДНК, синтезирана втората спирала на нуклеиновата киселина след всеки праймер в присъствието на термостабилна ДНК полимераза , Получават се две ДНК молекули. Процесът се повтаря многократно. За диагностика е достатъчна една молекула ДНК, т.е. Една бактерия или вирусна частица. Взаимодействие на допълнителен етап - синтеза на ДНК на молекулата на РНК с помощта на ензима обратна транскриптаза - позволява да се тества РНК вируси такива като HCV вирус. PCR е тристепенен процес, повтарящ се циклично: денатуриране, отгряване на праймера, синтез на ДНК (полимеризация). Синтезираното количество ДНК се идентифицира чрез ELISA или чрез електрофореза.
PCR може да се използва в различен биологичен материал - серум или кръвна плазма, остъргване на уретрата, биопсия, плеврална течност, гръбначно-мозъчната течност и т.н. Първата PCR се използва за диагностика на инфекциозни заболявания като вирусен хепатит В, вирусен хепатит С, вирусен хепатит D, CMV инфекция, инфекциозен полово предавани инфекции (гонорея, боклук diynaya, микоплазма, Ureaplasma инфекция), туберкулоза, ХИВ -infektsiya т.н.
Предимството на PCR при диагностицирането на инфекциозни заболявания спрямо други методи на изследване е следното:
- причинителят на инфекцията може да бъде намерен във всяка биологична среда на тялото, включително материал, получен чрез биопсия;
- Възможно е диагностицирането на инфекциозни заболявания в най-ранните стадии на заболяването;
- Възможна е количествена оценка на резултатите от изследването (колко вируси или бактерии се съдържат в изследваните материали);
- висока чувствителност на метода; например, чувствителност на PCR за откриване на ДНК на вируса на хепатит В в кръвта е 0,001 пг / мл (приблизително 4 х 10 2 копия / мл), докато чувствителността на метода ДНК хибридизация, използвайки разклонени сонди - 2,1 пг / мл (приблизително 7 х 10 5 копия / мл).
[