Причинител на туларемия

Туларемията е първично заболяване по животните (гризачи), при хората протича като остро инфекциозно заболяване с разнообразна клинична картина и бавно възстановяване. Причинителят на туларемията - Francisella tularensis - е открит от Г. Маккой и С. Чапин през 1912 г. по време на епизоотия сред земни катерици в района с езерото Туларе (Калифорния), подробно проучена от Е. Франсис, в чиято чест е кръстен родът.

Това са много малки, с размер 0,2-0,7 µm, кокоидни или елипсовидни полиморфни пръчици, които много често дават биполярно оцветяване при използване на специални методи за оцветяване; те са неподвижни, грам-отрицателни, не образуват спори; каталазо-отрицателни, образуват H2S, стриктни аероби, температурният оптимум за растеж е 37 °C, pH 6,7-7,2. Вирулентните щамове имат капсула, образуват киселина без газ при ферментация на някои въглехидрати (глюкоза, малтоза, маноза, фруктоза, декстрин), степента на ферментация варира между щамовете, съдържанието на G + C в ДНК е 33-36 mol%. F. tularensis не расте върху обикновени среди. G. McCoy и Sh. Chapin са използвали коагулирана жълтъчна среда. Върху нея туларемният бацил расте под формата на нежни малки колонии, наподобяващи капки роса, след което културата придобива характер на нежно шагреново покритие със слабо изразена слузеста консистенция. Е. Франсис предлага хранителен агар за отглеждане на туларемния бацил, съдържащ 0,05-0,1% цистин, 1% глюкоза и 5-10% кръв. Върху такава среда растежът е по-буен и грапав: колониите са кръгли с гладка повърхност, млечни на цвят, влажни, със слузеста консистенция, обградени от характерен зелен ореол. Растежът е бавен, колониите достигат максималния си размер на 3-5-ия ден (1 - 4 мм). Туларемните бактерии се размножават добре в жълтъчния сак на пилешкия ембрион, причинявайки неговата смърт на 3-4-ия ден.

Следните аминокиселини са необходими за растежа на F. tularensis: аргинин, левцин, изолевцин, лизин, метионин, пролин, треонин, хистидин, валин, цистин, за някои подвидове - серин, тирозин, аспарагинова киселина; освен това, за растежа им са необходими още пантотенова киселина, тиамин и Mg2 йони. Като се вземат предвид тези характеристики, за култивиране на F. tularensis могат да се използват синтетични среди.

Родът Francisella принадлежи към клас Gammaproteobacteria, тип Proteobacteria. Този род включва също F. novicida, чиято патогенност за хората не е установена.

Причинителят на туларемията е вътреклетъчен паразит. Неговата вирулентност се дължи на капсула, която инхибира фагоцитозата; невраминидаза, която насърчава адхезията; ендотоксин; алергенни свойства на клетъчната стена, както и способността за размножаване във фагоцитите и потискане на техния убиващ ефект. Механизмите на вирулентност все още не са дешифрирани. Освен това, в туларемния бацил са открити рецептори, способни да взаимодействат с Fc фрагменти на IgG имуноглобулини. В резултат на такова свързване се нарушава активността на комплементните системи и макрофагите.

F. tularensis в S-форма (вирулентна) има два антигена - O и Vi (капсулен антиген). O-антигенът е свързан с антигените на Brucella. Дисоциацията S->SR->R води до загуба на капсулата, вирулентност и имуногенност. Видът F. tularensis се разделя на три географски раси (подвидове):

• Холарктичен (нископатогенен за домашни зайци, не ферментира глицерол и не притежава ензима цитрулин уреидаза, срещан в страните от северното полукълбо);
• Централноазиатски (нископатогенен за зайци, има цитрулин уреидаза и ферментира глицерол);
• Неарктик (американски), по-патогенен за зайци, ферментира глицерол, има цитрулин уреидаза.

Освен това, щамовете от американския и централноазиатския подвид имат фосфатазна активност, която липсва при щамовете от холарктичния подвид.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ]

Резистентност на причинителя на туларемия

F. tularensis е доста устойчив във външната среда, особено ако се съдържа в патологичен материал. Във фураж, зърно, замърсени с екскременти на болни гризачи, оцелява до 4 месеца; във вода - до 3 месеца; в лед - повече от 1 месец. Чувствителен е към пряка слънчева светлина (умира за 30 минути), висока температура (при 60°C умира за 10 минути), под въздействието на 3% разтвор на лизол, 50% алкохол, формалин и други антисептици умира за 5-10 минути.

Епидемиология на туларемията

Основният резервоар на туларемия в природата са гризачите, сред които се наблюдават епизоотии в естествени условия. Хората се заразяват само от животни; патогенът не се предава от човек на човек. Патогенът е открит при 82 вида гризачи и зайцевидни, като най-често се среща при представители на 4 семейства: мишеподобни гризачи (Muridae), зайци (Leporidae), катерици (Sciuridae) и тушканчета (Dipodidae). В Русия основните носители са мишеподобните гризачи: водни плъхове, обикновени полевки, домашни мишки и ондатри.

Според чувствителността им към туларемия, животните могат да бъдат разделени на четири групи:

• Група 1 - най-чувствителни (полевки, водни плъхове, домашни мишки, бели мишки, морски свинчета и някои други). Минималната летална доза е една микробна клетка;
• 2-ра група - по-малко чувствителни (сиви плъхове, гофери и др.). Минималната летална доза е 1 милиард микробни клетки, но една микробна клетка е достатъчна, за да зарази някои от тях;
• 3-та група (хищници - котки, лисици, порове). Устойчиви на високи инфекциозни дози, заболяването протича без видими прояви;
• Група 4 - имунизирани срещу туларемия (копитни животни, студенокръвни животни, птици).

За хората минималната инфекциозна доза е една микробна клетка. Хората могат да се заразят по всички възможни начини: директен и индиректен контакт с болни гризачи, техни трупове или предмети, заразени с гризачи; алиментарен (чрез консумация на храна и вода, заразени с гризачи), въздушно-прахов и предаване. Заразяването с туларемийни бактерии е установено при 77 вида кръвосмучещи членестоноги. От особено значение са иксодовите кърлежи, при които патогенът персистира през целия живот и дори се предава трансовариално на потомството. Тези обстоятелства допринасят за установяването на заболяването в природата. Хората се заразяват с кърлежи не чрез ухапвания, а в резултат на попадане на патогена върху кожата заедно с екскрементите на кърлежа.

В Русия има 7 основни ландшафтни типа природни огнища на туларемия: блато, ливадно-поле, степ, гора, предпланински поток, тундра и тугай (пустиня).

[ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ]

Симптоми на туларемия

Причинителят на туларемията прониква в тялото през външните обвивки (увредена и непокътната кожа и лигавици). На мястото на проникване често се образуват язви. Чрез лимфните съдове бактериите навлизат в регионалния лимфен възел и свободно се размножават в него; възпалителният процес води до образуване на бубон. Оттук патогенът прониква в кръвта, бактериемията причинява генерализация на процеса, в него участват различни органи и тъкани, пролиферацията на бактерии в които води до образуване на грануломи и некротични язви. Алергичното преструктуриране на организма е свързано с бактериемия и генерализация. Инкубационният период на туларемията варира от 2 до 8 дни. Заболяването започва остро: появяват се треска, главоболие, мускулни болки, лицева хиперемия. По-нататъшното протичане зависи от мястото на входната врата, според което се разграничават следните клинични форми на туларемия: улцерозно-жлезиста (бубонна), очно-жлезиста, ангинозно-жлезиста, коремна и белодробна. Смъртността при туларемия не надвишава 1-2%.

Постинфекциозният имунитет е силен, персистиращ, в повечето случаи доживотен, има клетъчен характер, причинява се главно от Т-лимфоцити и макрофаги, в по-малка степен - антитела. Фагоцитозата при лица с имунитет е пълна.

Лабораторна диагностика на туларемия

За диагностициране на туларемия се използват всички микробиологични методи. Изследването се провежда в обезопасени лаборатории. Материалът за изследването - кръв, бубонна пункция, остъргване от язва, конюнктивален секрет, фарингеална плака, храчки и др. - се определя от клиничната форма на заболяването. Освен това за изследването могат да се вземат вода и хранителни продукти. В природни огнища на туларемия се провеждат планирани систематични изследвания за изолиране на причинителя на туларемия от гризачи.

Бактериологичният метод за диагностициране на туларемия при хора рядко дава положителни резултати. Чиста култура обикновено се изолира след натрупването ѝ върху чувствителни лабораторни животни. За биологични анализи се използват бели мишки и морски свинчета. Мишките се заразяват подкожно, морските свинчета - интраперитонеално; животните умират на 3-6-ия ден, понякога след слана. Заразените животни се държат в специални условия (както при диагностициране на чума) и се наблюдават в продължение на 6-14 дни. Опитните животни не умират в продължение на 7-15 дни, колят се на 15-20-ия ден и труповете се аутопсират. При наличие на туларемия се откриват патологични и анатомични промени под формата на продуктивен процес с некроза. Чиста култура се изолира от вътрешни органи върху жълтъчна среда, глюкозо-цистеинов кръвен фокус и др. Идентификацията се основава на морфологията и тинкториалните свойства на патогена, липсата на растеж върху MPA и аглутинацията с хомоложен серум. Патогенност за бели мишки и морски свинчета. Чиста култура може да се изолира чрез заразяване на 12-дневни пилешки ембриони и жълтъчния сак. За да се изолира чиста култура на патогена от вода, тя се центрофугира или филтрира през бактериални филтри и утайката се използва за заразяване на лабораторни животни. При изследване на хранителни продукти, те се промиват с MP B, центрофугират се и утайката се използва за заразяване на лабораторни животни.

Едновременно с бактериологичното изследване се приготвят намазки-отпечатъци от изследвания материал и се оцветяват по Романовски-Гимза. В намазки от органи могат да се открият малки кокоидни и пръчковидни бактерии, които са разположени вътреклетъчно и под формата на клъстери, образувайки нежна капсула.

За диагностика се използват подробна реакция на аглутинация, RPGA и RIF.

За ранна диагностика на туларемия (от 5-ия ден след началото на заболяването) се използват алергични тестове. Използват се два вида туларин и съответно два метода за тяхното приложение: кожен и интрадермален. Тъй като концентрацията на алергена и в двата вида туларин е различна, е неприемливо да се използва кожен туларин за интрадермален тест и обратно. Резултатите от алергичната реакция се отчитат динамично след 24, 36, 48 часа. Инфилтрат с диаметър най-малко 5 mm се счита за положителен резултат. При ваксинирани лица или прекарали туларемия алергичните тестове остават положителни в продължение на редица години (анамнестична реакция).

Специфична превенция на туларемия

За специфична профилактика се използва ваксина срещу туларемия, получена през 1930 г. от руските военни лекари Б. Я. Елберт и Н. А. Гайски от щам Me 15. Ваксината осигурява силен имунитет за 5-6 години при заразяване с европейския и холарктичния подвид и е ефективна срещу американския вариант на патогена. Ваксинацията се извършва по епидемиологични показания, както и за хора, принадлежащи към рискови групи. Допуска се едновременна ваксинация срещу туларемия и бруцелоза; туларемия и чума, както и срещу туларемия и някои други инфекции.

Неспецифичната превенция на туларемията е същата като при други зоонози и е насочена предимно към борба с гризачите.