Имунохистохимични маркери при диагностициране на предракови лезии на устната лигавица и червена граница на устните

Навременната и ефективна диагноза на неопластичните лезии на оралната лигавица (CRS) и червения ръб на ръба (CCG) остава сериозен проблем на онкостатологията. Сквамозният клетъчен карцином на устната кухина заема шесто място в света по честота сред злокачествените тумори на всички локализации. В Руската федерация честотата на злокачествените новообразувания на устната кухина е 2-4% от общия брой злокачествени тумори на човека.

През последните години структурата на заболяванията на лигавицата на устната кухина е претърпяла значителни промени, по-специално увеличаване на дела на предракови заболявания. В това отношение ефективното неинвазивно откриване на признаци на злокачествено заболяване остава спешна задача на стоматологията.

Въпреки очевидната простота на клинично изображения предиктор на промени на устната лигавица и CGC във връзка с външната локализация, определяне нозологична предрак основава само на впечатлението чрез инспекция и палпация, често водят до диагностични грешки са различни степени на кератинизацията или язва дори markornyh елементи поражението ги прави trudnodifferentsiruemymi. Особено трудно ранна диагностика на онкологични заболявания, тъй като се появяват неговите клинични симптоми малко по-късно в действителност става злокачествена трансформация.

По този начин изследването на V.P. Kharchenko et al. Показано е, че повече от 2/3 от пациентите по време на лечението в лечебното заведение и установяването на диагнозата имат III-IV стадии на заболяването. Една от причините за късното лечение е "замъгляването" на клиничната картина в началните етапи на заболяването. Освен това е доказана необходимостта от провеждане на организационна и методологична работа и повишаване на нивото на познания на зъболекарите за ранните клинични прояви на предракови заболявания на устната лигавица. Проведеното изследване показа, че само 42,8% от зъболекарите разграничават ранните прояви на рак на устната кухина, 4,2% от респондентите могат правилно да извършват първични диагностични мерки за откриване на рак на тази локализация.

Процентът на нелечими форми на рак на устната лигавица поради диагностични грешки, според различни автори, достига 58.4-70%. Ситуацията се усложнява от нерешените проблеми на клиничната диагноза на преканцера, особено от трудността при диференциране на появата на злокачествени заболявания, както и от проблема с избора на метод за лечение на прекурсорно заболяване. Няма абсолютни и относителни показания за биопсия, особено на етапите на консервативно лечение. Към днешна дата в литературата няма нито един пример за диагностичния критерий на клиничното ниво, за който зъболекарят може да се позовава при избора на подходящ метод за лечение на конкретно прекурсално заболяване.

Разрешаването на диагностичните трудности, които повечето автори виждат в помощните диагностични методи (цитология, хемостатомаскопия, биомикроскопия, оптична кохерентна томография). Тези методи обаче са по-скоро субективни, тъй като те носят само описателния характер на качествените промени в засегнатите тъкани. Един от начините за количествено определяне на морфологичните промени е да се определят имунохистохимичните маркери.

Въвеждането в съвременната практика на съвременните морфологични методи за проверка на тумора значително подобри качеството на диагностиката и лечението на злокачествени тумори. Методологични възможности на съвременната молекулно онкология повиши най понастоящем използват имунохистохимични изследвания може да се определи не само хистологична диагноза на тумора, но също така да се дават morphofunctional характеристики по отношение на агресивност и прогноза по отношение на предракови лезии и рак вече развити.

Съгласно съвременните идеи, основата на злокачествената трансформация на клетките е активирането на единични или множествени клетъчни онкогени или гени за потискане. Той се наблюдава при 30% от раковите заболявания при хора и в много случаи може да бъде открит имунохистохимично. Наблюдавани са онкогени ras р21, HER2 / neu, bcl-2 и супресорни гени p53 и Rb в различни тумори. Някои от изброените онкогени (и гени за потискане) са независими прогностични и предсказващи признаци.

Епителът на лигавицата на устната кухина е мястото, където се образуват ракови тумори. Външни фактори (травматични сайтове оклузия, острите ръбове на възстановявания несъстоятелност ортопедична дизайн, ирационално индивидуален хигиена на устната кухина, възпалителни и деструктивни периодонтални лезии), заедно с генетични (наследствени) фактори могат да играят роля в причиняването на рак на тази локализация. При разработването на плоскоклетъчен карцином на устната лигавица вреда могат да участват в механизмите на контролни процеси епителна хиперплазия и плоскоклетъчен метаплазия.

Морфологични характеристики на устната лигавица епител време на злокачествено заболяване свързано с промяна на набор от диференциация (фенотип цитокератин предимно епителен слой) маркери CEA експресия, както и пролиферация маркер Ki - 67.

Р53 - туморен ген - супресорен протеин продукт, който е фактор ядрен транскрипция с много функции, включително блокиране преминаването на клетки на клетъчния цикъл и индуциране на апоптоза. Протеинът p53 се експресира във всички клетки на тялото. При липса на увреждане на генетичния апарат, р53 протеинът е в неактивно състояние и когато се появи ДНК увреждане, ДНК се активира. Активирането се състои в придобиване на способността да се свързва с ДНК и активиране на транскрипцията на гени, които съдържат регулаторен регион на нуклеотидна последователност, която е определен елемент p53-отговор. Мутация на р53 в клетки срещащи около 50% от случаите на рак води до синтеза на протеини със загубата на неговите функции, но с висока стабилност и натрупване в ядрото, че имунохистохимично изразена в отделна ядрено оцветяване.

"Двойният" тип на wt-53 oncosuppressor гена и кодираният от него протеин р53 играят централна роля в развитието на апоптозата. Когато ДНК се повреди, се появява експресия на гена wt53 и съответния протеин. Последните блокира клетъчния цикъл в G1-S фаза и по този начин инхибират допълнително репликация на увредена ДНК, която се синтезира в етапа на S, и създава условия за отстраняване на увредената зона и ремонта модифицираната част. Ако възникне репарация, клетката продължава да се дели и дава поколение от здрави клетки. Ако обаче не възникне репарация, се включват други механизми, които осигуряват унищожаването на такава клетка с увредена (мутагенна) ДНК, т.е. Генетичната програма за клетъчна смърт се развива - апоптоза.
През последните години се предполага, че статусът на р53 може да бъде решаващ фактор, определящ чувствителността на тумора към химиотерапия и лъчетерапия. Потвърждение на това предположение са многобройни проучвания, доказващи, че мутиралият р53 е фактор на лоша прогноза и неефективност на адювантната терапия за различни неоплазми на устната лигавица.

Маркерите на пролиферацията също са силно информативна диагностична стойност при прогнозиране на хода на злокачествените тумори. Пролиферативната активност е водещ фактор както в механизма на злокачествена трансформация на клетките, така и в биологичното поведение на вече възникващите тумори. Обещаващ маркер на пролиферативна активност е Ki-67 антиген, който се експресира практически във всички фази на клетъчния цикъл и съответно отразява големината на пролиферативния пул. Генът, кодиращ Ki-67, се намира на дългото рамо на 10-тата хромозома. Ki-67 се отнася до регулаторни протеини. Нейният външен вид съвпада с влизането на клетката в митоза, което я прави възможно да се използва като универсален маркер на пролиферацията при оценката на растежа на злокачествените тумори.

Извършени са редица изследвания, които изследват диагностичната стойност на имунохистохимичните маркери при предсказване на хода на преканцерозните лезии на устната лигавица и червената граница на устните. Murti PR et al. Изследва експресията на р53 с червен фиксиран SSRI. Когато се установи имунохистохимичният метод, експресията на р53 не успя да разкрие злокачествения статус на преканцера на оралната лигавица. Авторите предполагат, че свръхекспресия на р53 пик време близо до момента на преобразуването на предраково рак, и не могат да се използват като ранен маркер на злокачественост предсказване предрак устната лигавица. Други изследователи откриха, че човешкият ген TP53 кодира най-малко 9 различни изоформи. Друг член на семейството р53, р63, включва 6 различни изоформи и играе ключова роля в развитието на оралната лигавица, слюнчените жлези, зъбите и кожата. Предполага се, че р63 е свързан с развитието на плоскоклетъчен карцином на главата и шията. Не са наблюдавани статистически значими промени в експресията на нови изоформи на р53 и р63 в преканцера на SSRI в сравнение с немодифицирана тъкан. Изследванията на De Sousa FA потвърждават прогностичната значимост на маркера p53 при определяне на потенциала на злокачествената трансформация на предракана на оралната лигавица. В същото време някои автори вярват, че p53 не може да се използва като единичен маркер за предсказване на развитието на рак.

Също обещаващ прогностичен имунохистохимично откриване равнина е представена в изследваната тъканни проби podoplanina на - интегрален мембранен мукопротеин изразена като непроменено и променя възпалителни и неопластични ендотел на лимфната капиляри. Изследователите са открили статистически значима връзка експресия podoplanina iABCG2 (АТР-свързващ протеин подгрупа G2) с риска от злокачествена трансформация на лихен планус (рискът е значително по-висока при коекспресия podoplanina и ABCG2, отколкото без коекспресия podoplanina и ABCG2) и заключи, че podoplanin и ABCG2 може да се използва като биомаркери за оценка на риска на злокачествена трансформация с предракови лезии RBCU

Изследванията на чуждестранни учени потвърждават диагностичната значимост на експресията на Fas / FasL като биомаркери за развитие на рак. Fas е тип I трансмембранен гликопротеин (синоними APO-I, CD95), и индуцира апоптоза в клетки след взаимодействие с Fas-лиганд (FasL) или агонистично моноклонално антитяло срещу Fas.

В същото време е известно, че Fas се експресира в почти всички типове тъкани. Повишена експресия на Fas се наблюдава в бъбреците, черния дроб, сърцето и тимуса. В допълнение, този рецептор се експресира на много тумори, както и на заразени с вируса клетки. Причината за резистентността на различни клетъчни типове към Fas-зависимата апоптоза може да бъде увеличаване на производството на разтворими Fas от тези клетки. Разтворимият Fas е продукт на алтернативно снаждане и е в състояние да инхибира апоптозата, предизвикана от агонистични моноклонални антитела срещу Fas или FasL.

Така двусмислен тълкуване на резултатите от изследвания, проведени от различни автори води до заключението, че в настоящия етап на молекулна онкология използва имунохистохимично маркер перспективно в комбинация с други методи за диагностика и прогнозиране на премалигнени лезии на устната лигавица.

От особено значение е проблемът с класифицирането на имунохистохимичните маркери за диагностично значение. Считаме, че в низходящо значение те могат да бъдат подредени в следния ред:

1. Имунохистохимични маркери с висока диагностична значимост: подпланлин, ABCG2, bcl-2;
2. Имунохистохимични маркери със средна степен на диагностично значение: Bax, MMP-9;
3. Обещаващи имунохистохимични маркери, чието диагностично значение изисква по-нататъшно изследване: ММР-2, МТ1-ММР, Fas / FasL;
4. Не са доказани имунохистохимични маркери, чието диагностично значение е да се предскаже хода на преканцерозните заболявания: p53, p63.

Въз основа на този анализ на литературата данни може да се заключи, че определянето на имунохистохимични маркери не следва да се разглежда като единственият метод за предсказване на хода на преканцерозни лезии на устната лигавица и определяне на риска от злокачествена трансформация, но, въпреки това, методът има висока диагностична стойност в комбинация с други методи за предсказване на хода на преканцерозни заболявания.

Старши изследовател Кузнецова Роза Гиленова. Имунохистохимични маркери при диагностицирането на преканцерозни лезии на лигавицата на устата и червената граница на устните // Практическа медицина. 8 (64) декември 2012 г. / том 1

[1], [2], [3], [4], [5]