PCR на хепатит С

HCV в материала обикновено липсва.

За разлика от серологично диагностициране на хепатит С вирусни методи, при откриване на антитела за HCV, PCR може да се открие присъствието на HCV РНК и директно количествено концентрацията му в материала. Изследването има специфична специфичност и висока чувствителност: десетте молекули на HCV РНК в тестовия материал са достатъчни за откриването му. Откриване на антитела срещу HCV само потвърждава факта, заразени пациента, но не позволява да се прецени дейността на инфекциозен процес (на вирусната репликация) и прогнозата на заболяването. В допълнение, антитела срещу HCV, открити в кръвта на пациенти с остър и хроничен хепатит, както и при пациенти, които са болни и се възстановява, но често антитела се появяват в кръвта само няколко месеца след появата на клинично заболяване, което го прави трудно за диагностициране. Откриването на HCV в кръвта чрез PCR е по-информативен диагностичен метод. Идентификация на HCV РНК чрез PCR доказателства за виремия, дава индикация за вирусна репликация в организма и е един от критериите за ефективността на антивирусна терапия. Откриване на HCV РНК чрез PCR в ранните етапи на вирусната инфекция на фона на пълната липса на серологични маркери може да бъде най-ранните доказателства от инфекция. Въпреки това, изолира откриване на HCV РНК в основата на пълната липса на други серологични маркери не може напълно да се изключи фалшив положителен резултат от PCR. В такива случаи е необходима всеобхватна оценка на клиничните, биохимичните и морфологичните изследвания с повтарящо се многократно потвърждаване на наличието на PCR инфекция.

От голямо значение е използването на метода на PCR при пациенти с хроничен вирусен хепатит С, тъй като в повечето от тях няма връзка между наличието на вирусна репликация и активността на чернодробните ензими. В такива случаи само PCR позволява да се прецени наличието на вирусна репликация, особено ако крайният резултат се изразява количествено. В повечето случаи изчезването на HCV РНК от кръвния серум настъпва по-късно от нормализирането на чернодробните ензими, така че тяхната нормализация не може да служи като основа за спиране на антивирусното лечение.

Практически е важно за откриването на HCV РНК да се изследва чрез PCR метод не само серум, но и лимфоцити, хепатобиобабам. Вирусите могат да бъдат открити 2-3 пъти по-често в чернодробната тъкан, отколкото в серума. Когато се оценяват резултатите от изследването на кръвния серум за HCV РНК, трябва да се има предвид, че виремията може да се колебае в природата (подобно на промяната в ензимната активност). Следователно, след положителни резултати от изследването за PCR, може да се получи отрицателен резултат и обратно. В такива случаи, за да се разрешат съмненията, които възникват, е по-добре да се изследват хепатобибатите.

Откриването на HCV РНК в материал с помощта на PCR се използва за следните цели:

• разрешаване на съмнителни резултати от серологични изследвания;
• диференциация на вирусния хепатит С от други форми на хепатит;
• откриването на острия стадий на заболяването в сравнение с прехвърлената инфекция или контакт; стадий на инфекция на новородени от серопозитивни HCV майки;
• мониторинг на ефективността на антивирусното лечение.

Пациенти със съмнение за вирусен хепатит С:

• донори;
• лица с рискови фактори;
• лица с повишена активност на ALT;
• пациенти с остър хепатит

Всички горни признаци на оценка на резултатите и подходите за диагностициране на HCV, използвайки PCR също се отнасят за други инфекции.

Методът на PCR позволява не само да се открие HCV РНК в изследвания материал, но и да се установи неговият генотип. Определянето на генотипа на вируса е от голямо значение за подбора на пациенти с хроничен вирусен хепатит С за лечение с интерферон-алфа и рибавирин. Лабораторните показания за лечение на хроничен вирусен хепатит С с интерферон алфа са, както следва:

• повишена трансаминазна активност;
• наличие на HCV РНК в кръвта;
• генотип 1 HCV;
• висока виремия в кръвта (повече от 8 × 10 ⁵ копия / ml).

Понастоящем съдържанието на HCV РНК в кръвния серум може да бъде количествено определено чрез PCR, което е от голямо значение за контрола на лечението с интерферон алфа. Нивото на виремия се оценява, както следва: за HCV РНК от 10 ² до 10 ⁴ копия / ml - слабо; от 10 ⁵ до 10 ⁷ копия / ml - средна, над 10 ⁸ копия / ml - висока. При ефективно лечение нивото на виремия намалява.

[1], [2], [3], [4]