Вирус на хепатит В

Хепатит В е инфекциозно заболяване на човек, характеризиращ се със селективно увреждане на черния дроб от вирус. Тази форма на хепатит е най-опасната в последиците си сред всички известни форми на вирусен хепатит. Неговият причинител е хепатит В вирус (HBV).

Първо антиген на вируса на хепатит В е открит Б. Блумберг през 1964 г. В серум австралийски Aborigine и патогенът е намерено 1970, D. Dane (и др.), И получи името на Dane частици, тъй като не е сигурно, че , че това наистина е вирус, а не неговите компоненти. Впоследствие всички съмнения изчезнаха, тъй като в частиците на Dane бяха открити геномна ДНК и вирусна DNA-зависима ДНК полимераза. Вирионът съдържа три основни антигени, за които през 1974 г. Са въведени следните наименования:

• HBsAg е повърхностен, или разтворим, или австралийски антиген.
• HBcAg е основен антиген (ко-антиген).
• HBeAg - д антиген, е локализиран в ядрото на вириона и, за разлика от HBcAg, не само е в вириона, но и циркулира в кръвта в свободна форма или като комплекс с анти-HBeAg. Той се секретира в кръвта от хепатоцитите с активна репликация на HBV.

Повърхностният антиген - HBsAg - съществува под формата на три морфологично различни варианта: 1) представлява суперкапсид на целия вирион; 2) в големи количества се получава под формата на частици с диаметър 20 nm, имащи сферична форма; 3) под формата на нишки с дължина 230 nm. Химически те са идентични. Съставът има общо HBsAg антиген и две двойки от взаимно изключващи детерминанти тип-специфични: г / г и т / г, така че има четири основни подтип HBsAg (и по този начин HBV): ADW, ADR, ayw и Aur. Антигенът a осигурява образуването на общ кръстосан имунитет към всички подвидове на вируса.

Всъщност, вирионът, Dain частицата, има сферична форма и диаметър 42 nm. Суперкапсидът на вириона се състои от три протеина: основната (основна), голямата и средната. Геномът е затворен в капсида и е представен от двойно-верижна пръстеновидна ДНК с маса 1,6 MD. ДНК се състои от приблизително 3200 нуклеотиди, но "плюс" е с 20-50% по-кратък от знака минус. С 5 'края на дългата нишка, вирус-специфичният протеин е ковалентно свързан. 5 'краищата на двете нишки са комплементарни и образуват "лепкави" последователности с дължина 300 нуклеотиди, така че нишките да са затворени в пръстена. Съдържанието на G + C в вирусовата ДНК е 48-49 молни%. В сърцевината на вириона има освен геномна ДНК-вирусна ДНК-зависима ДНК полимераза. Дефинираната от "минус" ДНК на HBV съдържа само четири гени (S, C, P и X), но те са организирани много компактно. Гените S, C, P, X силно се припокриват и контролират синтеза на следните продукти. Генът S кодира синтеза на основния протеин на обвивката и съдържа цялата информация за повърхностния антиген на HBsAg. В допълнение, той кодира синтеза на средни и големи белтъци на обвивката. Протеините съдържат общ COOH-край, но преводът им започва с три различни инициаторни кодона. ДНК кодове за синтеза на капсидни протеини (HBcAg и HBeAg); въпреки че тези протеини са кодирани от един единствен ген, начините на техния превод са различни. Джийн Р е най-големият. Той включва част от всичките три други гени и кодира ензимите, необходими за репликацията на вируса. По-специално, той кодира обратната транскриптаза, доменът на ензима RNA-ase Н, 5'-терминалния протеин на "минус" -реата. Генът X кодира протеини, които регулират експресията (експресията) на всички вирусни гени, по-специално протеин с маса 17 kD, който е ген транскрипционен трансактиватор.

Протеините, които образуват повърхностен антиген, съществуват в гликозилирана (gp) и негликозилирана форма. Гликозилирани са gp27, gp33, gp36 и gp42 (числата се означават с m в kD). Supercapsid HBV се състои от основен или основен S-протеин (92%); среден протеин М (4%) и голям или дълъг L-протеин (1%).

• Основният протеин, p24 / gp27 или основният протеин (протеин S), е основният компонент на HBV плика. При отсъствието на други протеини от черупката, тя полимеризира и образува сферични частици с диаметър 20 nm, които се състоят от 100 полипептидни молекули.
• Голям протеин, p39 / gp42 или дълъг протеин (L протеин) присъства във всичките три форми на HBsAg. Той играе важна роля в морфогенезата на вирионите и при излизането им от клетката. L-протеин съдържа последователност на М белтъка, който се допълва от N-крайните последователности на 108 (ayw), или 119 (ADW, ADR, Ayr) аминокиселинни остатъци кодирани NPE-Sl-S-генен регион.
• Средният протеин - gp33 / gp36 или протеинът М присъства и във всичките три морфологични форми на HBsAg. Протеинът М съдържа, в N-края, област от 55 аминокиселинни остатъка, кодирана от преди 52 област на S гена. Предполага се, че този сайт играе важна роля за разпознаването на вируса на хепатит В от чернодробни клетки с ограничен обхват на гостоприемника (човек, маймуна от шимпанзе). Протеиновите последователности, кодирани от S-гените npe-S области, имат висока имуногенност и техните детерминанти се намират на повърхността на вириона. Следователно, антитела срещу тези антигени играят важна роля в образуването на имунитет срещу хепатит В.

Синтезът на вирусни протеини е строго контролиран на нивото на транскрипция и транслация. При транскрипцията на вирусния геном се синтезират два типа иРНК:

• по-малък - 2100 нуклеотида - кодира основните и средните протеини на мембраната;
• голям - 3500 нуклеотида, т.е. По-дълъг от самата геномна ДНК; съдържа терминални повторения с дължина 100 нуклеотиди.

Този вид mRNA кодира капсидния протеин и продуктите на гена Р. Той също така е шаблон за вирусна ДНК репликация. Като част от генома има подобрители (подобрители на транскрипцията) - регулаторни елементи, които активират експресията на всички вирусни гени и действат главно в чернодробните клетки. По-специално генът S се експресира на много високо ниво само в чернодробните клетки и под влиянието на стероидни хормони. Това обстоятелство обяснява защо хроничният хепатит В и ракът на черния дроб (хепатом) се наблюдават при мъжете по-често, отколкото при жени с по-ниско ниво на стероидни хормони.

Други регулаторни елементи на вируса на хепатит В модулират (контролират) нивата на синтез на отделните протеини. Например, голям протеин се синтезира само в малки количества. Повечето от тях са на повърхността на инфекциозни вириони. А основният протеин и в по-малка степен средният протеин се синтезират в огромни количества и оставят клетките в повърхностните антигенни частици, които в серума съдържат многократно повече от зрелите вириони. Броят на повърхностните антигенни частици може да бъде 1011-1013 за 1 ml кръв (няколкостотин μg).

Вирусът на хепатит В е изолиран в нова фамилия вируси - Hepadnaviridae, род Orthohepadnavirus. Подобни хепаднавируси са открити в различни животни (земни протеини, мармоти, чипмони, пекински патици).

Възпроизвеждането на хепаднавируси се извършва по необичаен начин. По-специално, репликацията на геномна ДНК се осъществява чрез междинната връзка - РНК, т.е. С механизма на обратната транскрипция.

Животът на вируса на хепатит В.

• Адсорбция на клетката.
• Проникване в клетката през рецептор-медиирана ендоцитоза механизъм (граничи яма -> граничи флакон -> лизозом -> нуклеокапсид влизане и излизане на вирусния геном в ядрото на хепатоцитен).
• Вътреклетъчно възпроизвеждане.

По време на проникването в клетката късата ("плюс") ДНК верига се удължава (завършва). Сърцевина клетъчна ДНК-зависима РНК полимераза на синтезира РНК размер от 3500 нуклеотида (pregenom) иРНК и по-малки по размер, за синтеза на вирусни протеини. След това прегенери и вирусната ДНК полимераза се пакетират в ново синтезиран капсид, който се прехвърля в цитоплазмата. Тук възниква обратната транскрипция на прегенома. Той синтезира нова "минус" -дефинирана ДНК. След като синтезът на минус ДНК е завършен, прегеномната РНК е унищожена. Вирионната ДНК полимераза в "минус" веригата синтезира "плюс" верига. Вирусната ДНК, която вече е двойно усукана, може да съществува в клетката за доста дълго време и да се върне в ядрото за следващия цикъл на репликация. Ако новият вирус частицата не е подложена на допълнително репликация, нуклеокапсид образуван чрез преминаване през клетъчната мембрана, покрита superkapsidom, пъпка от клетката, и веднага се спря удължаване на "плюс" верига ДНК. Ето защо дължината на тази нишка е различна. В типична остра форма на маркери хепатит В серологични следните последователно се появяват в кръвта: HBsAg, HBeAg и антитела (IgM, IgG): анти-HBcAg. Анти-HBeAg и анти-HBsAg.

Съставът на вируса на хепатит В имат онкоген, но установи, че прониква в клетъчна хромозома (в различните секции), вирусната ДНК може да бъде индуциран в тях различен генетичен корекция - делеция, транслокация, усилване, което може да доведе до развитието на рак на черния дроб - един от най-сериозните последици от вирусния хепатит В.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8],

Устойчивост на вируса на хепатит В

Вирусът на хепатит В е силно резистентен. При стайна температура той остава жизнеспособен в продължение на 3 месеца, в замръзнало състояние - в продължение на няколко години. Вирусът е напълно инактивиран чрез автоклав (120 ° С) под обратен хладник в продължение на 30 минути, със суха топлина при температура 180 "С в продължение на 60 мин, при 60 ° С -. В продължение на 10 часа, устойчиви в кисела среда, но се разрушава в алкална. Вирусът умира, когато е обработен с Н202, хлорамин, формалин, фенол и с ултравиолетово облъчване.

Патогенеза и симптоми на хепатит В

Вирусът се инжектира хематогенно директно в черния дроб. В патогенезата на хепатита автоимунните хуморални и клетъчни отговори играят важна роля. Предполага се, че загубата на хепатоцитен дължи не толкова на прякото действие на самия вирус, но с имунологични реакции гостоприемници, които възникват във връзка с промяната на клетъчната мембрана на вирусни протеини, които предизвикват появата на автоантитела към чернодробни клетки. Ето защо, развитието на хроничен хепатит и цироза на черния дроб може да се счита за автоимунно заболяване.

Клетъчните автоимунни реакции към вирусни протеини, съдържащи се в хепатоцитната мембрана, се медиират от Т-цитотоксични лимфоцити и други клетки на чернодробните убийци. Следователно, острата дистрофия на черния дроб може да се разглежда като реакция на отхвърляне на особен хетерограф.

Инкубационният период трае от 45 до 180 дни, средно от 60 до 90 дни. Клиничният курс на хепатит В се характеризира с голямо разнообразие; може да възникне заболяване: в латентна форма, откриваеми само от лабораторни методи, в една типична форма на иктеричен и злокачествена форма смъртоносно край. Продължителността на етапа преди жлъчката варира от един ден до няколко седмици. Иктерични период обикновено е дълъг и се характеризира с добре определени симптоми (жълтеница, хипербилирубинемия, тъмна урина, жълтеница склерата). Продължителни форма се наблюдава в 15-20% от пациентите, и 90% от тях развиват хроничен хепатит В. Пациенти с хронична форма често наблюдавани автоимунни процеси се придружават от високо съдържание на protivopechenochnyh антитела, които се откриват чрез ензимно-свързан имуносорбентен анализ (IPM). При децата хепатит В е лек и често без жълтеница, при малки деца - предимно без симптоми.

Постинфекциозният имунитет (хуморален и клетъчен) е дълъг, през целия период, поради неутрализиращи вируса антитела (анти-HBsAg) при отсъствие на повърхностен антиген в кръвта. Често наблюдавана латентна имунизация поради повтарящ се контакт с HBV, което е причина за широко разпространения имунитет към вируса сред населението. Обикновено пациентите с остра форма на хепатит В се възстановяват напълно, когато антителата се натрупват. Въпреки това, в някои случаи въпреки високото ниво на вирусен антиген в кръвта (обстоятелство, обясняващо защо парентералната инфекция се появява най-често), не се произвеждат антитела срещу него. Вирусът остава в черния дроб, а човек дълго време, понякога за цял живот, става хроничен носител. Това обстоятелство очевидно е свързано със слаб имунен отговор. Един от най-честите резултати от хроничен хепатит В е цироза и чернодробен рак, който се развива след латентен период до 30-50 години.

Епидемиология на хепатит В

Източникът на инфекция с вируса на хепатит В е само човек. Противно на предишни изявления, че инфекцията с вируса на хепатит В се среща изключително чрез парентерално приложение, сега е доказано, че тя се открива в различни секрети и екскрети :. Слюнка, назофарингеален секрет, изпражнения, слъзния течност, сперма, менструалната кръв и т.н. По този начин, инфекция се проявява не само чрез парентерален път, но и сексуално и вертикална (от майката на плода), т. Е. На практика инфекция с вируса на хепатит в могат по много начини.

Хепатит Б в света убил толкова хора, колкото през годините на Втората световна война. Броят на носителите на HBV, според СЗО, е от 0,1 до 20% от населението на различни държави или региони.

[9], [10], [11], [12], [13], [14], [15], [16],

Диагностика на хепатит В

Понастоящем основният метод за диагностициране на хепатит В е използването на обратна пасивна реакция на хемаглутинация (ROSGA) за откриване на вирус или неговия повърхностен антиген, HBsAg. Както вече беше отбелязано, кръвта на повърхностния антиген съдържа многократно повече от самия вирус (100-1000 пъти). За реакцията на ROPGA, еритроцитите са сенсибилизирани с антитела срещу вируса на хепатит В. Ако има антиген в кръвта, възниква реакция на хемаглутинация. ROPGA е проста, удобна, много специфична. За откриване на антитела към HBsAg вирусния антиген се използват различни имунологични методи (DSC, RPGA, IFM, RIM и др.). В допълнение, PCR вариантите се използват за откриване на HBV и неговите антигени.

Различни имунологични методи могат да се използват за откриване на антитела в серума на пациента към вирусен антиген (HBsAg) (RSK, TPHA, утаечна реакция, IPM и др HLR.).

[17], [18], [19], [20], [21], [22],

Специфична профилактика на хепатит В

Като се има предвид високата честота на хепатит В, както и това, че в света има много носители на HBV, според препоръките на СЗО са ваксинирани срещу хепатит В са задължителни и трябва да се извършва през първата година от живота. Предлагат се два вида ваксини за ваксинация. За да се подготви една от тях, плазмата на носители на вируси се използва като суровина, тъй като вирусният антиген в него се съдържа в количества, достатъчни за получаването на ваксината. Основното условие за приготвянето на този тип ваксина е тяхната пълна безопасност, т.е. Пълна инактивация на вируса, която се осигурява от технологията за получаване на ваксини. За производството на ваксина от различен тип се използват методи за генно инженерство, по-специално се използва рекомбинантен клон на дрожди, който произвежда повърхностен антиген на вируса на хепатит В, за да се приготви антигенен материал.

И двете ваксини са много ефективни (предпазват 95% от ваксинираните). Продължителността на имунитета след ваксината е не по-малко от 5-6 години. Ваксини са създадени както за възрастни, така и за кърмачета и малки деца - най-важният компонент в глобалната борба срещу хепатит В. Пълният курс на ваксинация се състои от три инжекции:

Доза - веднага след раждането; II доза - след 1-2 месеца; III доза - до края на първата година от живота.

Тези ваксини са включени в разширения програма на имунизация, Световната здравна организация и съобразен с календара на неговото изпълнение (според препоръките на СЗО за първото година от живота се извършва ваксинация срещу туберкулоза, полиомиелит, хепатит В, морбили, тетанус, дифтерия, коклюш).

Гамаглобулин, съдържащ антитела срещу HBV, се използва за аварийна пасивна имунопрофилактика на лица, които са имали контакт с пациент с хепатит В.

За лечение на хепатит В (остри и хронични форми) се използва интерферон и амиксин (за индуциране на ендогенния му синтез). При лечението на хроничен хепатит В е ефективно ново лекарство ламивудин (синтетичен нуклеозид).