Конфокальная микроскопия

Конфокалната микроскопия се счита за един от най-обещаващите методи за изобразяване на кожата in vivo и поради това интересът към нея както сред клиницистите, така и сред представителите на научноизследователските институти е необичайно висок.

[1], [2], [3], [4], [5]

Конфокална способност за микроскопия

В дерматологията конфокалната лазерна микроскопия се използва за:

• изследване на проникването на съединения в кожата (пътища на проникване, кинетика, разпределение в кожата);
• наблюдение на жлезите (дефиниция на активно и пасивно състояние);
• проучвания на микроциркулационното легло (включително в реално време);
• диагнозата на неоплазмите.

Без обсъждане на предимствата и недостатъците на посочените по-горе видове конфокална микроскопия, ние се отбележи, че всички по-голяма взискателност набира популярност флуоресценция лазерна конфокална микроскопия през последните години.

[6], [7], [8], [9],

Конфокална микроскопия за изследване на кожата

Confocal микроскопия осигурява два безценни възможности - Проучване на тъканите на клетъчно ниво в състояние на физиологичен живот и демонстрации на резултатите от научните изследвания (т.е. Клетъчната активност ..) в четири измерения - височина, ширина, дълбочина и време. За качеството на изображението и дълбочината на изследване най-важната роля играе способността на тъканта да предава светлина, с други думи, нейната прозрачност. Методът на конфокалната микроскопия е безконтактна, лъчът на светлината не причинява никаква вреда или дискомфорт на пациента или експерименталното животно.

За изследване на кожата се използва конфокална сканираща лазерна микроскопия (CSLM). Методът ви позволява да виждате епидермиса и папиларния дермиден слой с разделителна способност близка до хистологичната. Всички резултати от изследванията се показват на монитора и се записват като пакет от файлове с изображения (под формата на микрофилми (в динамика) или микрофотографии).

Има два вида методи:

• Рефлективното (отражение на CSLM) - се основава на факта, че различните вътреклетъчни и междуклетъчни структури имат различен индекс на пречупване на светлината, което позволява да се получи контрастно изображение.
• Fluorescent (флуоресценция CSLM) - използва лазерна светлина прониква в кожата и има стимулиращо действие или екзо endohromofory, които са отговорили започне да излъчва фотони (т.е. Флуоресцира ..).

Страничната разделителна способност е минималното разстояние между точките, разположени на хоризонталната равнина, т.е. Равнина, успоредна на повърхността на кожата. Аксиалната разделителна способност е минималното разстояние между точките, разположени в равнина, перпендикулярна на повърхността на кожата.

[10], [11], [12], [13], [14], [15], [16], [17], [18]

Историята на конфокалната микроскопия

Идеята да се създаде микроскоп, способен на клетъчно ниво да покаже интравитален разрез на жива тъкан, беше активно разработен преди 130 години. Основният елемент на съвременните микроскопи е проектиран в края на XIX век и е въртящ се диск с най-малките дупки, разположени спирално. Този диск е изобретен през 1883 г. От германски студент Павел Нипков, в чест на който получава своето име - диска "Нипков" (или "нипков диск"). Изобретението се основава на способността на светлината да преминава през най-малките отвори в диска и увеличителната леща да проникне в дълбочината на тъканта и да освети клетъчния фрагмент на разстояние от повърхността. Когато дискът се върти бързо, фрагментите се добавят към цялостната картина. Чрез премахването или приближаването на структурата към обекта, дълбочината на оптичната част на изследваната тъкан може да се променя.

Едва с появата на VTRs през 80-те години и компютрите, способни да обработват изображения, в началото на 90-те години имаше реална възможност да се създадат и приложи ефективно съвременните микроскопи, използвани в наше време.