Анализ на слюнка

Слюнката е удобна биологична течност за диагностика: събирането ѝ е лесно, безболезнено и без игла. Слюнката частично отразява състава на кръвта, хормоналните колебания и следи от определени инфекции и лекарства. През последните години тя се превърна във валидна проба за редица тестове: от бърз скрининг за ХИВ до мониторинг на кортизола, както и за генетични изследвания, използващи ДНК от букални клетки. Слюнката обаче има различни силни и слаби страни за различни цели – важно е да се разбере това, преди да се направи тестът. [ 1 ]

Ключовите предимства включват лекота на събиране, ниски логистични разходи и възможност за събиране на проби у дома. Това е полезно за скрининг на населението (напр. за SARS-CoV-2), в ситуации, когато вземането на кръвни проби е трудно, и за серийни измервания (напр. 24-часов кортизолов профил). Освен това, слюнката често се понася по-добре от деца и хора с повишена тревожност. Слюнката обаче не се е превърнала в универсален заместител на кръвта: много зависи от специфичния маркер и методология. [ 2 ]

Ограниченията включват по-ниски концентрации на много маркери, влиянието на храната, тютюнопушенето, кървенето на венците, водите за уста и времето от деня. Поради това, насоките за подготовка за тестване на слюнка са по-строги: обикновено се изисква да се въздържате от хранене или пиене поне 30 минути, да не си миете зъбите и да избягвате всичко, което би могло да замърси кръвта или да разреди пробата. За някои тестове времето за събиране е строго регулирано (напр. късно вечер за кортизол). [ 3 ]

Обхватът на тестването на слюнка се разширява бързо, но регулаторните органи и професионалните общества подчертават, че е необходима надеждна валидация, преди тестът да се прехвърли от кръв към слюнка. Например, някои стоматологични и онкологични биомаркери все още са във фаза на изследване и стандартизация, докато слюнката отдавна се използва в реалната практика за скрининг на ХИВ и диагностика на хиперкортизолизъм. [ 4 ]

Таблица 1. Къде слюнката вече „работи“ и къде все още се изследва

Посока	Примери за полезност	Статус
Инфекции	Бърз скрининг за ХИВ с помощта на орална течност; молекулярни тестове за SARS-CoV-2	Широко използван (съгласно инструкциите за тестване)
Ендокринология	Късно вечерно изследване на слюнчения кортизол за скрининг за синдром на Кушинг	Препоръчано в ръководствата
Токсикология	Скрининг за течни орални наркотици на работното място (съгласно федералните насоки)	Регулиран в САЩ (SAMHSA/DOT)
Генетика	Домашни ДНК комплекти (23andMe и други)	FDA е одобрена за редица доклади
Стоматология/Микробиом	Биомаркери на пародонтит и кариес	В процес на разработка/валидиране

Въз основа на прегледи и позиции на регулаторните органи. [ 5 ]

Основните видове тестове за слюнка: какво точно могат да тестват?

Инфекциозни болести

Слюнката се използва за скрининг за ХИВ у дома: тестът за орална течност OraQuick дава резултати за приблизително 20 минути. FDA подчертава необходимостта от стриктно спазване на инструкциите и от внимание към „периода на прозореца“: скорошни инфекции може да не бъдат открити; ако имате съмнение, са необходими лабораторни изследвания. Избягвайте хранене, пиене, пушене или използване на вода за уста 30 минути преди теста. [ 6 ]

За SARS-CoV-2, слюнката е показала сравнима диагностична точност с назофарингеалните тампони в няколко проучвания и мета-анализи, особено с RT-PCR. Изборът на вид проба обаче зависи от конкретния тест и инструкциите на производителя му; CDC напомня: винаги проверявайте какви проби приема вашата лаборатория. [ 7 ]

В педиатрията, слюнката като проба опрости тестването за COVID-19: някои проучвания показват чувствителност >80% за RT-PCR, базирана на слюнка. Диапазонът на оценките за точност обаче е широк, така че е най-добре да се следват алгоритмите на институцията и да се повтори тестването, когато клиничното съмнение е високо. [ 8 ]

Ролята на слюнката за други вирусни и бактериални маркери също се изследва. Прегледите от последните години показват нарастваща доказателствена база, но все още са необходими стандартизация и регулаторно одобрение за рутинното прилагане в много клинични условия. [ 9 ]

Хормони (предимно кортизол)

Късно вечерното изследване на кортизол в слюнката е един от трите основни скринингови теста за синдром на Кушинг, заедно с ниска доза дексаметазон и 24-часово изследване на свободен кортизол в урината. Събира се до леглото на пациента между 23:00 часа и полунощ: това е времето, когато нивата на кортизол би трябвало да са ниски при здрави индивиди. Повишените стойности на слюнката показват загуба на циркаден ритъм. [ 10 ]

Слюнченият кортизол отразява свободния (биологично активен) плазмен кортизол, което го прави подходящ за наблюдение на динамиката при пациенти с хиперкортизолизъм. Някои центрове, след консултация с лабораторията, използват масспектрометрия (LC-MS/MS) за подобряване на специфичността. Изборът на метод и референтни стандарти трябва да бъде съгласуван с конкретната лаборатория. [ 11 ]

Подготовката за вземане на проби е от решаващо значение: не яжте, не пийте, не мийте зъбите си и не изплаквайте устата си в продължение на 30-60 минути; избягвайте кървене на венците и инхалиране/локални стероиди малко преди вземането на проби. Неспазването на инструкциите е честа причина за фалшиви резултати. [ 12 ]

Половите хормони в слюнката се измерват по-рядко: данните за тестостерон са приемливи с правилния метод, но точността на имунологичните тестове за естрадиол и прогестерон е значително по-ниска от тази на масспектрометрията; не се препоръчва използването на такива тестове за избор на заместителна терапия без отчитане на кръвни проби. [ 13 ]

Токсикологичен скрининг (лекарства)

Оралната течност е официално включена във федералните насоки на САЩ за тестване на служители. За точност са необходими сертифицирани лаборатории и стандартизирано събиране. Прозорецът за откриване обикновено е по-кратък, отколкото при урината, но пробата се „заменя“ по-трудно и по-добре отразява скорошната употреба. Подробни насоки са описани от SAMHSA и в задължителните федерални насоки. [ 14 ]

През 2023 г. Министерството на транспорта на САЩ одобри течните проби за орално приложение като приемлив вид проба за програмите на DOT (със сертифицирани лаборатории). Това разширява възможностите за тестване в райони със специални изисквания за безопасност. Специфични панели, прагове и потвърждение (GC-MS/LC-MS) са определени от регламента. [ 15 ]

Както при други матрици, предварителните имунологични анализи на слюнката се допълват от потвърждение с масспектрометрия за положителни/съмнителни резултати. Интерпретацията се извършва от специалисти (MRO) съгласно установените процедури. [ 16 ]

Генетика и микробиом

Слюнката е стандартната проба за домашни ДНК тестове: през 2017 г. FDA за първи път одобри генетичните доклади на 23andMe директно до потребителя за редица заболявания и рискове. Тези комплекти предоставят информация за статуса на носител и генетичните рискови фактори, но не предоставят диагноза, нито заместват консултацията с лекар. [ 17 ]

Правилата за събиране на ДНК от слюнка са изключително строги: не яжте, не пийте, не мийте зъбите си и не пушете поне 30 минути; съберете приблизително 2 мл; и незабавно смесете с буфер, който стабилизира ДНК. Неспазването води до ниски добиви и необходимост от повторно събиране. Други компании също прилагат същите принципи. [ 18 ]

Слюнката се изучава активно в стоматологията/медицината като източник на биомаркери за възпаление, пародонтит, кариес, някои тумори и метаболитни нарушения. Досега това са предимно научни и валидирани клинични проекти; някои от тези проучвания все още не са получили одобрение от FDA, както откровено подчерта Американската дентална асоциация. [ 19 ]

Таблица 2. Сравнение на популярни тестове за слюнка

Категория	Какво търси той?	Когато е уместно	Ограничения/Важни нюанси
ХИВ (орална течност)	Антитела	Домашен скрининг	"Прозорец" след инфекция; стриктно следвайте инструкциите
SARS-CoV-2 (RT-PCR)	Вирусна РНК	Масови прегледи, опростено самостоятелно събиране	Зависи от тестовата система; ако вероятността е висока, повторете/алтернативна проба
Кортизол (късно вечер)	Свободен кортизол	Скрининг за хиперкортизолизъм, мониторинг	Краткосрочни срокове и кратка подготовка; LC-MS/MS е по-добър в спорни случаи
Лекарства (орална течност)	Метаболити/непроменени вещества	Работни програми, скорошна употреба	Кратък срок, изискват се сертифицирани процедури
ДНК	Генетични варианти от букални клетки	Скрининг за носителство/риск, родословия	Не поставя диагноза; изискват се насоки за събиране

Източници: насоки и документи на регулаторни органи. [ 20 ]

Как да дарим слюнка: Подготовка, време и техника

Основни правила: 30-60 минути преди вземане на пробата не яжте и не пийте (дори вода за някои тестове), не си мийте зъбите, не си изплаквайте устата, не пушете и не дъвчете дъвка. Ако изплаквате устата си с вода, изчакайте поне 10 минути, за да избегнете разреждане на слюнката. Ако венците ви кървят, отложете вземането или използвайте алтернативна проба. [ 21 ]

Методите за събиране варират. Пасивното слюноотделяне осигурява достатъчен обем за повечето хормонални и молекулярни тестове. За домашните устройства често се използват тампони/ролери; важно е да не поглъщате сорбента и да следвате стриктно инструкциите. За ДНК комплекти, съберете слюнка до маркировката и веднага затворете капака с буфера. [ 22 ]

Времето на деня е от решаващо значение за хормоните: късно вечер кортизолът се събира между 23:00 и 12:00 часа (или както е предписано от лекар), а „отговорът на събуждането“ се събира стриктно след събуждане и 30 минути по-късно. Неспазването на срока прави резултатите трудни за интерпретиране и често изисква повторно изследване. [ 23 ]

Съхранение и транспорт: Повечето комплекти съдържат стабилизатор; без такъв, пробата трябва бързо да се охлади/изпрати. За лабораторни панели за COVID-19 следвайте инструкциите за контейнера и запечатването. За токсикологични тестове са въведени отделни системи за проследяване. [ 24 ]

Таблица 3. Инструкции за приготвяне на анализ на слюнка

За колко?	Какво да направите	Защо
≥ 60 минути	Не яжте; докладвайте за лекарства (стероиди, инхалатори)	Храната/стероидите изкривяват маркерите
≥ 30 минути	Не пийте, не си мийте зъбите и не изплаквайте устата/не използвайте вода за уста.	Разреждане/кръв → фалшиви резултати
След 10 минути	Можете да изплакнете с вода и да изчакате.	Отстранете остатъците от храна, без да разреждате пробата
В посоченото време	Сглобете стриктно според инструкциите	За кортизола и други, циркадният ритъм е важен.

Инструкции за колекции и лаборатории. [ 25 ]

Обяснение и ограничения: по раздел

Инфекции. Отрицателен домашен тест за ХИВ не изключва скорошна инфекция. Ако има риск, повторете теста след 3 месеца или използвайте лабораторен ELISA/PCR тест. Положителният бърз резултат изисква потвърждение в клиника. За COVID-19 някои тестови системи са валидирани за слюнка, докато други не са; ако клиничното съмнение е силно, се препоръчва повторна или алтернативна проба съгласно инструкциите на CDC и производителя. [ 26 ]

Хормони. Слюнченият кортизол е отличен скринингов тест за хиперкортизолизъм, но интерпретацията се основава на два независими положителни резултата от различни методи (както е препоръчано от ендокринологичните алгоритми). За половите хормони, слюнчените ELISA тестове са уязвими към кръстосани реакции, докато валидни резултати се получават по-често с LC-MS/MS; плазмата обикновено се използва за насочване на терапията. [ 27 ]

Токсикология. Праговите стойности и прозорците за откриване варират в зависимост от веществото. Обикновено урината открива употреба „по-дълго“ от слюнката, докато слюнката открива употреба „по-близо до времето“. Предимствата на слюнката включват намален риск от заместване и по-голяма проследимост. Всички скринингови процедури се потвърждават чрез масспектрометрия в съответствие със SAMHSA/DOT. [ 28 ]

Генетика/микробиом. ДНК комплектите предоставят надеждни генотипове, когато са събрани правилно, но генетичните рискове не са диагноза, а по-скоро тема за обсъждане с лекар. Слюнчените биомаркери за зъбни и системни заболявания са активно развиваща се област; те все още не са стандартизирани за рутинна диагностика на много състояния. [ 29 ]

Таблица 4. Кога слюнката е добра идея и кога друга проба е по-добра

Задача	Подходяща ли е слюнката?	Защо/алтернатива
Домашен скрининг за ХИВ	Да (OraQuick)	Удобно; не забравяйте за „периода на прозореца“
Скрининг за синдром на Кушинг	Да (късен кортизол)	Препоръка на дружествата; строг срок
Скрининг за наркотици „тук и сега“	Да	Къс прозорец, по-труден за подмяна
Избор на ХЗТ въз основа на естрадиол/прогестерон	Вероятно не.	Предпочита се кръв/LC-MS/MS
Диагностика на много стоматологични рискове	Ограничена наличност засега	Биомаркери в процес на разработване и валидиране

Подкрепено от насоки и прегледи. [ 30 ]

Време, точност и фактори, които най-често „развалят“ резултата

Времето за обработка зависи от теста: бързото тестване за ХИВ отнема около 20 минути; RT-PCR за SARS-CoV-2 в слюнка отнема 24 часа или по-малко, в зависимост от лабораторията; тестването за кортизол в слюнката обикновено отнема 1-3 работни дни. Домашните ДНК комплекти отнемат повече време за обработка поради логистиката и обема на тестовете. Проверете с вашата лаборатория/производител за времето за обработка. [ 31 ]

Подготовката на пробите и техниката на събиране имат най-голямо влияние върху точността. Храна/напитки, вода за уста и кървене на венците причиняват фалшиво отрицателни/положителни резултати; за кортизол времето е от решаващо значение. В токсикологията веригата на съхранение и потвърдителните методи са важни. За COVID-19 видът на пробата трябва да отговаря на инструкциите за конкретната тестова система. [ 32 ]

При хормоните изборът на анализ влияе върху специфичността: масспектрометрията по-добре разделя целевия хормон от свързаните молекули и метаболити. Тестостеронът в слюнката е показал приемлива стабилност, докато анализите на естрадиол/прогестерон чрез ELISA често са неточни – това трябва да се вземе предвид при клиничните решения. [ 33 ]

При съмнение, най-добрият подход е да повторите теста с идеална подготовка или да изберете „златен стандарт“ (кръв/урина/намазка), ако е известен и е наличен за вашето приложение. Това ще спести време и ще намали риска от погрешно тълкуване. [ 34 ]

Таблица 5. Често срещани източници на грешки и как да ги избегнем

Грешка	До какво води това?	Какво да направите
Яжте/пийте < 30 минути преди вземане на проби	Разреждане/инхибитори	Строг пост според инструкциите
Почистване/кървене на зъби	Примес от кръв → фалшиво повишени	Отложете събирането, лекувайте гингивит
Неправилно време (кортизол)	Неправилно тълкуване на ритъма	Аларма/напомняне, изчистване на времевия печат
Не смесвайте слюнка с буфер (ДНК)	Ниска мощност/повторение	Веднага затворете капака и разклатете.

Подготовка съгласно ръководствата и инструкциите. [ 35 ]

Кратки отговори на често задавани въпроси

Може ли слюнката винаги да замести кръвните изследвания? Не. За някои тестове (кортизол късно вечер, скрининг за ХИВ, ДНК тестове) слюнката е ефективна; за други (естрадиол по време на ХЗТ, много туморни маркери) кръвта е за предпочитане. Следвайте препоръките и инструкциите за вашия конкретен тест. [ 36 ]

Колко надеждни са домашните тестове за ХИВ със слюнка? Когато се използват според указанията, те осигуряват надежден скрининг, но могат да пропуснат ранните инфекции. Всеки положителен резултат се потвърждава в клиника. [ 37 ]

Точна ли е слюнката за COVID-19, колкото назален тампон? Често е сравнима с RT-PCR, но това зависи от конкретната тестова система и клиничния контекст; следвайте инструкциите на производителя и алгоритмите на CDC/IDSA. [ 38 ]

Как да се подготвите за тест за кортизол в слюнката? Не яжте/пийте/мийте зъбите си в продължение на 30-60 минути, не пушете и събирайте пробата строго между 23:00 часа и полунощ (освен ако не е посочено друго). Избягвайте кървене на венците и скорошна употреба на перорални стероиди. [ 39 ]

Таблица 6. Алгоритъм за бърз избор: слюнка или друга проба?

Клинична задача	Първи избор	Алтернатива
Скрининг за хиперкортизолизъм	Слюнен кортизол (късно вечер)	Дневен свободен кортизол в урината, ниска доза DST
Домашен скрининг за ХИВ	Слюнка (OraQuick)	Кръв/лабораторен ELISA/PCR
Потвърждение и продължителност на употребата на наркотици	Слюнка „засега“, урина „за по-дълго“	Кръв/коса - съгласно протокола
Мониторинг на естроген/прогестеронова ХЗТ	Кръв (серум/плазма)	Слюнка - само с валиден LC-MS/MS и резервации
Масов скрининг за SARS-CoV-2	Слюнка, ако е валидирана	Назални/назофарингеални тампони

Препоръки от общества и регулаторни органи. [ 40 ]

Ключови констатации

• Слюнката е удобна и демонстрируема проба за редица цели (скрининг за ХИВ, кортизол късно вечер, токсикология „тук и сега“, домашна ДНК). Винаги следвайте инструкциите: 30-60 минути, без нищо в устата, избягвайте кървене и събирайте в точното време. [ 41 ]
• За половите хормони и много „експериментални“ биомаркери, слюнката все още не е заместител на кръвта: точността зависи от метода (LC-MS/MS е най-добър) и някои тестове все още се валидират. Ако резултатите са неубедителни, разчитайте на „златния стандарт“ и повторете. [ 42 ]