Агрегация на тромбоцитите с ристоцетин (фактор на фон Вилебранд )

Референтните стойности (норма) на активността на фактора на фон Вилебранд са 58-166%.

Факторът на фон Вилебранд се синтезира от ендотелни клетки и мегакариоцити. Той е необходим за нормалната адхезия на тромбоцитите и има способността да удължава полуживота на фактор VIII. Плазменият коагулационен фактор VIII - антихемофилен глобулин А - циркулира в кръвта като комплекс от три субединици, обозначени като VIII-k (коагулираща единица), VIII-Ag (основният антигенен маркер) и VIII-vWF (фактор на фон Вилебранд, свързан с VIII-Ag). Смята се, че факторът на фон Вилебранд регулира синтеза на коагулационната част на антихемофилния глобулин А (VIII-k) и участва в съдово-тромбоцитната хемостаза.

Болестта на фон Вилебранд е наследствено заболяване, характеризиращо се с удължено време на кървене, намалена активност на ристоцетиновия кофактор и намалена (в различна степен) коагулантна активност на фактор VIII. Клиничните прояви на заболяването са подобни на тези на тромбоцитопатията. Въпреки това, пациенти със значително намалена активност на фактор VIII могат да получат хематоми и хемартроза.

Въз основа на лабораторни изследвания, които ни позволяват да определим структурата и активността на фактора на фон Вилебранд, се разграничават следните форми на заболяването.

• Тип I (70% от всички случаи) се характеризира с леко понижение на ристоцетиновия кофактор (фактор на фон Вилебранд) и коагулантната активност (VIII-k) с нормална макромолекулна структура на фактора на фон Вилебранд.
• Тип II: основава се на селективен дефицит на високомолекулни полимери на фактора на фон Вилебранд, поради нарушения в структурата на този протеин.
  • Тип IIB се причинява от повишено взаимодействие между фактора на фон Вилебранд и тромбоцитите, а повишеното клирънс на тромбоцитните агрегати води до тромбоцитопения.
• Тип III се характеризира с тежък количествен дефицит на фактора на фон Вилебранд, което води до клинично значимо намаляване на активността на фактор VIII (VIII-k).

Съдържанието на фактора на фон Вилебранд се определя в случаите, когато времето на кървене е увеличено, броят на тромбоцитите е в рамките на референтните стойности и няма очевидни причини за тромбоцитна дисфункция. За оценка на фактора на фон Вилебранд се определя количественото съдържание на фактора на фон Вилебранд (изследване на активността на ристоцетин-кофактора), изследва се индуцираната от ристоцетин тромбоцитна аглутинация и антигенната структура на фактора на фон Вилебранд, свързан с фактор VIII (VIII-vWF).

Определянето на тромбоцитната агрегация с ристоцетин в плазмата се използва за количествена оценка на фактора на фон Вилебранд. Установена е линейна зависимост между степента на агрегация на ристоцетин и количеството на фактора на фон Вилебранд. Методът се основава на способността на този антибиотик (ристоцетин) да стимулира in vitro взаимодействието на фактора на фон Вилебранд с тромбоцитния гликопротеин Ib. В повечето случаи на болестта на фон Вилебранд се наблюдава нарушена агрегация на ристоцетин при нормален отговор към ADP, колаген и адреналин. Нарушена агрегация на ристоцетин се открива и при макроцитна тромбодистрофия на Бернар-Сулие (липса на рецептори за агрегация на ристоцетин върху тромбоцитната мембрана). За диференциация се използва тест с добавяне на нормална плазма: при болестта на фон Вилебранд агрегацията на ристоцетин се нормализира след добавяне на нормална плазма, докато това не се случва при синдрома на Бернар-Сулие.

Изследването може да се използва и в диференциалната диагноза на хемофилия А (дефицит на фактор VIII) и болест на фон Вилебранд. При хемофилия съдържанието на VIII-k е рязко намалено, а съдържанието на VIII-fB е в нормалните граници. Клинично тази разлика се проявява с факта, че при хемофилия се наблюдава хематомно-хематомен тип кървене, а при болест на фон Вилебранд - петехиално-хематомен тип.

Ристоцетин-индуцираната аглутинация на тромбоцитите е намалена в повечето случаи на болестта на фон Вилебранд, с изключение на тип IIB.

Антигенната структура на фактора на фон Вилебранд, свързан с фактор VIII (VIII-vWF), се открива чрез различни имунологични методи, а разпределението на фактора на фон Вилебранд по молекулен размер се определя чрез електрофореза в агарозен гел. Тези тестове се използват за установяване на вида на болестта на фон Вилебранд.

Изследването на тромбоцитната агрегация с различни индуктори се провежда не само за идентифициране на нарушения на функциите на тромбоцитната агрегация. Това изследване позволява да се оцени ефективността на антитромбоцитната терапия, да се изберат индивидуални лекарствени дози и да се проведе лекарствен мониторинг.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]