Антитела към нуклеарни антигени (антинуклеарен фактор) в кръвта

При здрави хора титърът на антителата към ядрените антигени в кръвния серум е 1:40-1:80 (клинично значим титър е ≥1:160 при използване на метода на индиректна имунофлуоресценция; при използване на скринингови методи - под 1:50).

Антинуклеарен фактор - антитела към цялото ядро. Това е хетерогенна група автоантитела, които реагират с различни компоненти на ядрото. Определянето на антитела към ядрени антигени в кръвния серум е тест за системни заболявания на съединителната тъкан. Скринингът за наличие на антинуклеарни антитела в кръвния серум се извършва чрез радиоимунологичен анализ (RIA), реакция на свързване на комплемента (CFR) или ELISA.

Положителните резултати от скрининга трябва да бъдат потвърдени чрез метода на индиректна имунофлуоресценция. Като клетъчен субстрат се използват препарати, приготвени от суспензия от клетки с големи ядра [от човешки епителни клетки от линията HEp-2 - ракови клетки на ларинкса или срези от черен дроб на мишка]. Видът на оцветяване (характерът на разпределението на флуоресцентния маркер в клетките) е различен за различните заболявания и определя посоката на по-нататъшно определяне на специфичността на антинуклеарните антитела.

• Дифузното оцветяване (равномерно разпределение на маркера) е най-малко специфичното, възможно при системен лупус еритематозус, лекарствено-индуциран лупусен синдром и други автоимунни заболявания, както и при възрастни хора. В случай на дифузно оцветяване на клетките, реакцията трябва да се повтори с по-високо разреждане на тествания кръвен серум. Ако типът оцветяване остане същият, най-вероятно антигенът, срещу който са насочени антинуклеарните антитела, е дезоксирибонуклеопротеин.
• Хомогенно или периферно оцветяване се наблюдава, когато в изследвания серум преобладават антитела към двуверижна ДНК. Този тип оцветяване се среща най-често при системен лупус еритематозус.
• Петнистото или шарено оцветяване се дължи на антитела към екстрахируеми ядрени антигени и обикновено се наблюдава при смесено заболяване на съединителната тъкан, синдром на Сьогрен и лекарствено-индуциран лупусен синдром.
• Нуклеоларното оцветяване (разпределение на маркерите в ядрото) се причинява от антитела срещу рибонуклеопротеин (вижте по-долу). Този тип оцветяване е типично за системна склеродермия и понякога е възможно и при други автоимунни заболявания.
• Центромерното или дискретно петнисто оцветяване се причинява от антитела към центромера (специализиран домейн на хромозомите) и е характерно за CREST синдрома и други автоимунни ревматични заболявания.

Основната цел на изследването за антинуклеарни антитела е да се идентифицира системен лупус еритематозус, тъй като при това заболяване те се появяват в кръвния серум на 95% от пациентите в рамките на 3 месеца след началото му.

Определянето на антитела към ядрени антигени е от голямо значение за диагностиката на колагенозите. При нодуларен полиартериит титърът (с помощта на скринингови методи) може да се увеличи до 1:100, при дерматомиозит - до 1:500, при системен лупус еритематозус - до 1:1000 и по-висок. При системен лупус еритематозус тестът за откриване на антинуклеарен фактор има висока степен на чувствителност (89%), но умерена специфичност (78%) в сравнение с теста за откриване на антитела към нативна ДНК (чувствителност 38%, специфичност 98%). Антителата към ядрени антигени са високо специфични за системен лупус еритематозус. Поддържането на високо ниво на антитела за дълго време е неблагоприятен признак. Намаляването на титъра предвещава ремисия или (понякога) фатален изход.

При склеродермия честотата на откриване на антитела към ядрени антигени е 60-80%, но техният титър е по-нисък, отколкото при системен лупус еритематозус. Няма връзка между титъра на антинуклеарния фактор в кръвта и тежестта на заболяването. При ревматоиден артрит често се разграничават SLE-подобни форми на заболяването, така че антитела към ядрени антигени се откриват доста често. При дерматомиозит антитела към ядрени антигени в кръвта се откриват в 20-60% от случаите (титър до 1:500), при нодуларен полиартериит - в 17% (1:100), при болестта на Сьогрен - в 56% при комбинация с артрит и в 88% от случаите при синдром на Гугеро-Сьогрен. При дискоиден лупус еритематозус антинуклеарният фактор се открива при 50% от пациентите.

В допълнение към ревматичните заболявания, антитела към ядрени антигени в кръвта се откриват и при хроничен активен хепатит (в 30-50% от случаите), като титърът им понякога достига 1:1000. Автоантитела към ядрени антигени могат да се появят в кръвта при инфекциозна мононуклеоза, остра и хронична левкемия, придобита хемолитична анемия, болест на Валденстрьом, чернодробна цироза, билиарна цироза, хепатит, малария, проказа, хронична бъбречна недостатъчност, тромбоцитопения, лимфопролиферативни заболявания, миастения и тимоми.

В почти 10% от случаите антинуклеарният фактор се открива при здрави хора, но в ниски титри (не повече от 1:50).

През последните години е разработен ензимно-имунологичен метод за определяне на антинуклеарни антитела с различни спектри, който е лесен за изпълнение и постепенно замества имунофлуоресцентния метод.

Редица лекарства могат да доведат до фалшиво положително увеличение на титъра на антинуклеарни антитела: аминосалицилати, карбамазепин, изониазид, метилдопа, прокаинамид, йодиди, перорални контрацептиви, тетрациклини, тиазидни диуретици, сулфонамиди, нифедипин, β-блокери, хидралазин, пенициламин, нитрофурантоин и др., поради способността на тези лекарства да предизвикват смущения по време на изследването.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]