Използването на клетъчни технологии за подобряване на появата на белези

Съвременната наука се характеризира с бързото развитие на редица сродни дисциплини, обединени под общоприетото наименование "биотехнология". Този клон на науката, на базата на най-новите постижения в областта на биологията, цитология, молекулярната генетика, генно инженерство, transplantantologii, има за цел да се извлече полза от огромния потенциал на растителни и животински клетки - основна структурна единица на всички живи същества. "Жива клетка е готов биотехнологичен реактор, в който се прилагат не само процесите, които водят до образуването на крайния продукт, но и редица други системи за улесняване на поддържането на каталитичната активност на високо ниво" - Джон Удуърд, 1992. Като се започне науката на клетката е бил пуснат в 1665, когато английският физик Р. Хуек създава първия микроскоп и в гнездото намерени клетки - cellulae ("клетки"). През 1829 г. М. Шлейдън и Т. Шван обосновават "клетъчната теория", която доказва, че всички живи същества се състоят от клетки. Р. Вирхов през 1858 г. Доказа, че в основата на всички болести се нарушава структурната организация и метаболизма на клетките. Той станал основател на "клетъчната патология". Основният принос към науката на клетката е направен през 1907-1911. Р. Гарисън и А. А. Максимов, доказващи възможността за култивиране на клетки извън тялото. Тяхната работа показва, че за отглеждането на клетки, животинските тъкани и части от растения трябва да бъдат механично разглобени на малки парченца. За да се изолират клетките, тъканите се нарязват с остър нож или микротом в тънки участъци, приблизително 0,5-1,0 mm. Физическото разделение на клетките се нарича имобилизация. Изолираните клетки се получават чрез ензимна дисперсия на парчета от растения или тъкани. След раздробяване с остри ножици парчетата се третират с трипсин или колагеназа, за да се получи суспензия - суспензия на отделни клетки или техните микроагрегати в специална среда. Алгинатните гелове (калциев алгинат) се използват широко за имобилизиране на растителни клетки. Доказано е, че имобилизираните растителни и животински клетки запазват способността си за биосинтеза. Продуктите от клетъчен биосинтез се натрупват в клетките, тяхната експресия се получава спонтанно или с помощта на специални вещества, които подпомагат повишената пропускливост на клетъчните мембрани.

Култивиране животински клетки - много по-сложен процес, отколкото отглеждането на растителни клетки, което изисква специално оборудване на модерна, високи технологии, наличието на различни медии, растежни фактори, целящи запазване на жизнеспособността на клетките и ги поддържа в състояние на висока функционална активност. Установено е, че повечето от клетките на твърди тъкани, като например бъбреците, черния дроб, кожата и са зависими повърхност, така че ин витро може да се култивира само под формата на монослой или тънки слоеве, които са пряко свързани с повърхността на субстрата. Дълголетието, пролиферацията и функционалната стабилност на клетките, получени чрез диспергиране на ензимна тъкан, до голяма степен зависи от субстрата, на който са отгледани. Известно е, че всички клетки, получени от гръбначни тъкани имат отрицателен повърхностен заряд, така че положително заредени субстрати са подходящи за тяхната имобилизация. Изолираните клетки, получени директно от цели тъкани, могат да се поддържат в първичната култура в имобилизирано състояние, като същевременно се поддържа висока специфичност и чувствителност за 10-14 дни. Имобилизираните повърхностно зависими клетки играят важна роля в биологията днес, особено тяхната роля е важна за клиничните изследвания. Те се използват за изследване на цикли на клетъчно развитие, регулиране на техния растеж и диференциация, функционални и морфологични разлики между нормалните и туморните клетки. Имобилизираните монослоеве на клетки се използват в биотести, за количествено определяне на биологично активни вещества, както и за изследване на ефектите от различни лекарства и токсини върху тях. Големият интерес към клетката като медицинско устройство е доказан от лекари от всички специалности в продължение на няколко десетилетия. В тази посока се развиват бързо клетъчните технологии.

С появата на тъканна и клетъчна терапия, името на известния руски учен V.P. Филатов, който през 1913 г. Положи основите за ученията на терапия тъкан изучаване корнеални транспланти на здрави донори при пациенти с катаракта .. При работа, трансплантация на роговицата, той установи, че роговица консервирани на студено в продължение на 1-3 дни при температура от -2 -4 градуса С става по-добре от пресни. По този начин беше установено клетки да отделят собственост при неблагоприятни условия някои вещества, които стимулират жизнените процеси в трансплантираната тъкан и регенеративни тъкани в реципиента. Тъканта и клетките, отделени от тялото, са в състояние на опит, т.е. Забавен живот. В тях кръвообращението спира и следователно хранене. Тъканното дишане е изключително трудно, сърбежът и трофичните са разстроени. Като в ново качествено състояние, адаптирайки се към новите условия на съществуване на клетката, те произвеждат специални вещества, притежаващи лечебни свойства. Тези вещества с непротеинова природа са посочени от В. П. Филатов като биогенни стимуланти. Тя V.V.Skorodinskoy определен заедно с материала, от животни и растения могат да бъдат свободно T обработват в автоклав при 120 градуса по Целзий в продължение на един час след съхранение при неблагоприятни условия, а те не само не загуби активност, а напротив, тя подсилена, благодарение на добива биологични стимуланти от консервирани тъкани. Освен това те са загубили антигенни свойства, което значително намалява възможността за отхвърляне. Консервирани стерилен материал се инжектира в тялото чрез имплантиране (настръхване) под кожата или под формата на екстракти от инжектиране, за да се получи подходящи резултати. Също така беше установено, че тъканите на фетуса съдържат значително повече биологично активни субстанции от възрастните тъкани и някои фактори се намират само в ембрионите. Инокулираните фетална тъкан реципиентен организъм не се възприема като чужди за отсъствие в състава на цитоплазмената мембрана протеини, отговорни за видовете, тъкан, и индивидуална специфичност (протеини, главния хистосъвместим комплекс). В резултат на това, инокулирането на човешки фетални тъкани в човешкото тяло не предизвиква механизмите на имунологична защита и реакцията на несъвместимост и отхвърляне. В. П. Филатов в медицинската практика широко използва човешката плацента и кожата. Лечебните курсове се състоят от 30-45 инжекции от тъканни екстракти и 1-2 импланти от автоклавирани тъкани.

След като започна изследвания с човешки и животински тъкани и клетки, той прехвърли своите обобщения към растителния свят. Производство на експерименти върху живи части от растения (алое, живовляк, агаве, цвекло върхове и жълт кантарион, и т.н.), той ги е създал към неблагоприятни условия, като поставите разреза оставя на тъмно място, като за живота на растението се нуждае от светлина. От калния торф и торфът също са били давани биогенни стимулатори, поради факта, че кал и торф са образувани с участието на микрофлора и микрофауната.

Нов кръг от развитие на тъканите терапия получи в края на 70-те години, когато натрупаните знания и десетилетия на опит позволиха на изцяло ново ниво да използват животински и растителни тъкани и клетки при лечение на хора и да удължи активния му дълголетие. Така че в някои от местните клиники и редица чужди жени в физиологичен менопауза, менопауза или фон оофоректомия за забавяне на процеса на стареене, развитието на атеросклероза, остеопороза, дисфункция на имунната, ендокринната и нервната система започна да се държи тъкан терапия зародишните тъкани на плацента, хипоталамуса, черния дроб, яйчниците, тимуса и щитовидната жлеза. В един от най-престижните на Gerontius-козметични клиники в Западна Европа за същата цел в продължение на десетилетия, използвайки екстракти инжекции, получени от зародишните тъкани на половите жлези на овце.

В нашата страна широко се използва биостимулиращо лечение. Пациенти с различни заболявания доскоро активно прилагат инжекции плацента екстракти, алое, kolanhoe, stonecrops големи (biosed) FIBS, peloidodistillyat, peloidin, torfot, gumizol получени чрез процедура Filatov. В момента в аптеките е практически невъзможно да се купят тези високоефективни и евтини препарати за домашна тъкан от животински, растителен и минерален произход.

В основата получат различни хранителни препарати от тъкани и органи на човешкото внесени като румалон (от хрущялна тъкан и костен мозък) aktovegin (от телешка кръв) solkoseril (кръв екстракт говеда) и вътрешните лекарства - стъкловидното тяло ( стъкловидното тяло говеда око) Керакол (от роговицата на едър рогат добитък), splenin (от далака на едър рогат добитък), epitalyamin (от epitalyamo и епифизата област) също лежи Филатов изследвания. Общото свойство за всички тъканни препарати е цялостният ефект върху целия организъм. По този начин, "тъкан терапия" Академик Филатов беше в основата на повечето съвременни разработки и тенденции в хирургия, имунология, акушерство и ginekoloii, геронтологията, combustiology, дерматология и козметология, свързани с клетъчната и продукти от неговата биосинтеза.

Проблемът с трансплантацията на тъкани тревожи човечеството от древни времена. Така че в папируса на Еберс от 8 000 г. Пр.н.е. Вече се споменава за използването на тъканна трансплантация, за да се компенсират дефектите в отделните части на тялото. В "Книгата на живота" на индийския учен сушрута, който е живял за 1000 литра. Пр.н.е. Има подробно описание на възстановяването на носа от кожата на бузите и челото.

Необходимостта от донорска кожа нараства пропорционално на увеличаването на броя на пластичните и реконструктивните операции. В тази връзка, започна да използва кожата на мърша и фетуса. Имаше нужда от запазване на донорски средства и идентифициране на възможности за човешки тъкани на кожата на замяна на животните, различни изпълнения на симулацията на кожата. И това е в тази област работи учени, когато през 1941 P.Medovar първо показа фундаменталната възможността за растежа на кератиноцитите ин витро. Следващата важна стъпка в развитието на клетъчната технология е работата на Karasek М. М. Чарлтън, който през 1971 г. Извършва първата успешна трансплантация на автоложни кератиноцити от първична култура на заешки рани, като се използва като субстрат за отглеждане на KC колагенов гел, като по този начин повишаване на клетъчна пролиферация в културата. J.Rheinvvald. H Зелен. Са разработили технология за серийно отглеждане на големи количества човешки кератиноцити. През 1979 г., зелен и колеги откриха, перспективите за медицинско използване на кератиноцитите клетъчна култура във възстановяването на кожата с обширни изгаряния, след което тази техника, която непрекъснато се подобряват, то започва да се използва от хирурзите горят центрове в чужбина и у нас.

В процеса на изследване на живи клетки показват, че клетките произвеждат не само биогенни стимулатори на небелтъчен произход, но също и редица цитокини, невротрансмитери, фактори на растежа, полипептиди, които играят важна роля в регулирането на хомеостаза на целия организъм. Установено е, че в различни клетки и тъкани се съдържат пептидни биорегулатори. Които имат широк спектър от биологични ефекти и координират развитието и функционирането на многоклетъчните системи. Продължи ерата на приложението на клетъчната култура като терапевтичен агент. В нашата страна tansplantatsiyu спиране на фибробласти и кератиноцитите клетъчни слоеве ламинирани през последното десетилетие ние сме приели в combustiology. Такава активна интерес в трансплантацията на клетките на кожата изгорени поради необходимостта от бързо затваряне на големи повърхности и изгаряния дефицит донор кожата. Възможността за една малка част от кожата по големина разграничи клетки, които могат да покриват повърхността на раната от 1000 и дори 10 000 пъти по-голяма от площта на донор на кожата е много атрактивни и важни за Combustiology и горят пациенти. Процентът на присаждане кератиноцити слоеве варира в зависимост от изгаряне района, възрастта и здравословното състояние на пациента от 71.5 до 93.6%. Интересът към трансплантацията на кератиноцити и фибробласти свързана не само с възможност за бързо затваряне на дефекта на кожата, но също така и на факта, че тези трансплантации имат мощен биоактивен потенциал за подобряване на външния вид на тъкани, получени от трансплантации. Новообразувание на кръвоносните съдове, отстраняване на хипоксия, подобряване на трофизъм, ускорено узряване на незрели тъкан - че морфо-функционална основа на тези положителни промени, които се провеждат поради освобождаването на трансплантирани клетки, растежни фактори и цитокини. Така, благодарение на въвеждането в клиничната практика на напреднали клетъчни технологии трансплантация многоклетъчни слоеве на автоложни и алогенни кератиноцити и фибробласти на обширни рани повърхности, Combustiology имаха възможност не само за намаляване на смъртността от изстрел с голям процент на кожни лезии, но също така и за подобряване качеството на белег тъкан, което неминуемо се появява на мястото на изгаряния IIb и IIIa и 6 градуса. Опитът combustiologists получени при лечението на рани повърхности при пациенти с изгаряния, предложени от идеята да се използват вече е модифициран метод на Грийн в дерматологията и хирургична практика в различни кожата и козметични патология (трофични язви, витилиго, невус булозна епидермолиза, премахване на татуировки, свързани с възрастта промени по кожата, както и за подобряване на появата на белези).

Използването на алогенни кератиноцити в хирургия, дерматологията и combustiology има няколко предимства пред primeneiya автоложни кератиноцити като клетъчен материал могат да бъдат получени предварително в неограничени количества, запазени и се използват, когато е необходимо. Също така е известно, че алогенните КС имат намалена антигенна активност, тъй като Langerhans клетки, носители на антигени на HLA комплекс, се губят in vitro култивиране. В полза на използването на алогенни KC се казва, че те се заместват с автоложни след трансплантацията, според данни на различни автори от 10 дни до 3 месеца. Във връзка с това в много страни са създадени клетъчни банки, благодарение на които клетъчните трансплантации могат да бъдат произведени в точното количество и в точното време. Такива банки са в Германия, САЩ, Япония.

Интересът към използването на клетъчни технологии в областта на дерматологията и козметологията се дължи на факта, че "клетъчен състав" носи силен биоенергетично и информационен потенциал, благодарение на които е възможно да се получи качествено нови резултати от лечението. Автокоините, освободени от трансплантираните клетки (растежни фактори, цитокини, азотен оксид и т.н.), действат предимно върху собствените си фибробласти, повишавайки тяхната синтетична и пролиферативна активност. Този факт е особено привлекателен за изследователите, тъй като фибробластите са ключовата клетка на дермата, чието функционално състояние зависи от състоянието на всички слоеве на кожата. Известно е също, че след cauter нараняване на кожата, лазер, игла и други инструменти, от костен мозък, мастната тъкан и капилярната pericyte се попълва с пресни кожата фибробластни стволови прекурсори че насърчава "подмладяване" басейн собствени клетки. Те активно започват да синтезират колаген, еластин, ензими, гликозаминогликани, растежни фактори, и други биологично активни молекули, което води до увеличаване на хидратация и васкуларизация на дермата, подобряване на неговата сила,